Prospecção de antibióticos contra Mycobacterium tuberculosis a partir de metabólitos secundários provenientes de uma actinobactéria isolada da caatinga brasileira

Abstract

Microrganismos produtores de metabólitos secundários são fontes confiáveis e promissoras de moléculas bioativas, fornecendo uma perspectiva para a descoberta de inovadoras terapias contra a tuberculose. Actinobacteria se trata de um filo composto por uma variedade de bactérias Gram-positivas, notável devido à sua capacidade de produzir metabólitos secundários de grande atividade. Foi isolada uma cepa de actinobactéria denominada “UEPB11A”, do solo da Caatinga paraibana, com o objetivo de avaliar a atividade de metabólitos secundários que possam ser de interesse farmacológico no tratamento contra a tuberculose. Sua morfologia é característica, possuindo forma filamentosa e pseudo-hifas. Seus esporos possuem comprimento médio de 1,17 μm (±0,14 μm), estando dispostos em cadeia, com morfologia reniforme e glabra. Seus esporos foram inoculados em meio mineral mínimo M9 e mantidos a 37°C sob constante agitação durante 14 dias. Posteriormente, a cultura foi filtrada e o meio livre de células foi particionado com butanol e diclorometano, sendo submetido à separação por cromatografia líquida em coluna. As frações obtidas foram concentradas por rotaevaporação e em seguida, analisadas por cromatografia em camada delgada (CCD), sendo reunidas aquelas com o mesmo perfil. As 36 frações resultantes foram reconstituídas em dimetilsulfóxido e submetidas ao teste de viabilidade celular, estimando suas atividades microbicidas, utilizando resazurina como indicativo de atividade metabólica da linhagem H37Ra de Mycobacterium tuberculosis, diluídos a uma densidade óptica de 0,006 em Middlebrook 7H9. As 22 frações com atividade demonstrada no screening foram diluídas em série, em faixas de concentração de 100-0,8 μg/mL,, e testadas contra a micobactéria. Foram realizados controles positivos utilizando moxifloxacino e rifampicina. A fração 2-3 apresentou CIM de 6,25 μg/mL, e as frações 4 e fração DCM, de 3,125 μg/mL. Foi realizada a elucidação estrutural da fração DCM através de espectros de Ressonância Magnética Nuclear uni e bidimensionais. Os resultados alcançados indicam um potencial de aplicação das actinobactérias encontradas no semiárido paraibano em pesquisas de descoberta de novos medicamentos para o tratamento da tuberculose, destacando a necessidade de estudos direcionados à avaliação do mecanismo de ação, perfil de segurança e toxicidade de tais metabólitos ativos. Essa pesquisa contribui para a expansão do conhecimento sobre os recursos biotecnológicos do bioma da Caatinga e seu potencial impacto na produção de novos medicamentos.