Carreadores lipidicos nanoestruturados desenvolvidos por método de baixa energia contendo bixina para uso em terapia fotodinâmica contra candida albicans

Abstract

Candidíase é uma infecção oportunista causada principalmente pelo fungo da Candida albicans, seu tratamento envolve o uso de antifúngicos que enfrentam resistência microbiana, toxicidade e alto custo de alguns fármacos. Tendo em vista que a terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT) é uma opção alternativa de tratamento que gera espécies reativas de oxigênio (EROs) para lesar microorganismos, torna-se uma opção viável para o tratamento da candidíase. A aPDT necessita de fotossensibilizadores, desse modo, a bixina (BIX), um carotenóide que possui absortividade de luz no intervalo de 300-500 nm, pode ser empregada como fotossensibilizador (FS) na aPDT. Em contrapartida, a BIX não é solúvel em meio fisiológico, sendo necessário incorporá-la em carreadores lipídios nanoestruturados (CLN). Assim, objetivou-se desenvolver um CLN por baixa energia contendo BIX (CLN-BIX) para uso na aPDT contra C. albicans. Os carreadores foram preparados por inversão de fases por temperatura, caracterizados pelas técnicas de eficiência de encapsulação (EE%) por espectofotometria UV-vis (λ=364 nm), espalhamento de luz dinâmico (DLS), termogravimetria(TG) e atividade antifúngica por concentração inibitória mínima (CIM) e contagem de colônia (CC). O CLN-BIX apresentou-se como mistura homogênea de cor amarela. A EE% demonstrou um resultado satisfatório a partir da encapsulação de 8,15 mg de BIX por grama de fase lipídica de CLN. O DLS do CLN-BIX resultou em diâmetro hidrodinâmico médio de 239,15 nm, encontrado na faixa muito próxima da ideal de nanopartículas para entrega de fármacos, obtive índice de polidispersão (IPD) de 1,64 e potencial zeta (PZ) de -12,70 mV, sugerindo estabilidade estérica entre partículas por estarem próximos a ± 30 mV. Na TG, a BIX demonstrou boa estabilidade térmica e o CLN-BIX apresentou perda de 90,45% de massa próximo a 100°C, em razão de sua grande composição de água. Em relação a CIM, a BIX, sem luz e com luz, apresentou CIM de 125 e 62,53 µg/mL, respectivamente, enquanto o CLN-BIX sem luz e com luz apresentaram CIM de 250 e 125 µg/mL, respectivamente. CIM com valores de 50 a 500 µg/mL indicam excelente atividade antimicrobiana. Na CC, o grupo sem luz apresentou redução de 1 log (90%) para a BIX, mas não houve redução para CLN-BIX. Na presença de luz houve redução de 2 logs (99%) e 1 log (90%), respectivamente, mostrando uma redução estatística significativa. Conclui-se que foi possível produzir o CLN-BIX com tamanho e propriedades físico-químicas satisfatórias. Foi demonstrada excelente atividade antifúngica por CIM, mesmo a BIX tendo melhor atividade que o CLN-BIX sua incorporação é imprescindível para a solubilidade da BIX em meio fisiológico.