Resumo:
O presente trabalho teve por objetivo estabelecer procedimentos necessários à clonagem e
expressão da proteína E da dengue. Realizou-se amplificação in vitro do gene da proteína E
dos sorotipos 2 e 4 da dengue por meio de reação em cadeia da polimerase (PCR). A digestão
do vetor de clonagem pGEX-2T foi realizada com a enzima de restrição Sma I com a
subsequente remoção de fósforo das extremidades 5’ do vetor digerido utilizando-se fosfatase
alcalina. Foram geradas células quimio-competentes a partir de Escherichia coli BL21, as
quais foram posteriormente transformadas com a utilização do vetor pGEX-2T por meio de
choque térmico. A PCR para o gene da proteína E apresentou necessidade de otimização. A
digestão do vetor com a enzima Sma I ocorreu conforme esperado, bem como a geração de
células quimio-competentes e a transformação bacteriana. Com a realização da presente
pesquisa, foi possível estabelecer procedimentos até então não disponíveis para esta linha de
pesquisa na Universidade Estadual da Paraíba.
Descrição:
ARAÚJO, H. C. dos S. Amplificação do vetor de clonagem pGEX-2t em células E. coli quimio-competentes e digestão do vetor com a enzima de restrição Sma I. 2015. 40f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Ciências Biológicas)- Universidade Estadual da Paraíba, Campina Grande, 2015.
